Estudio comparativo de marcadores moleculares y valores c de dna entre plantas estaminadas y pisitiladas de sotol (dasylirion cedrosanum)

Abstract

"En la presente investigación se realizó un estudio a nivel molecular a fin de buscar marcadores AFLP asociadas a la diferenciación sexual temprana en sotol (Dasylirion cedrosanum) y comparar por citometría de flujo cantidades de DNA por célula entre los dos sexos de la misma especie. Se realizó un muestreo aleatorio de plantas identificadas como macho y hembra en dos localidades del Desierto Chihuahuense (Buenavista, Coahuila y Providencia, Zacatecas). Para el análisis de AFLP, se aisló DNA de las plantas seleccionadas por el método de López et al. (1995) y se formaron 4 compuestos de 10 individuos cada uno, dos compuestos con hembras y dos con machos. Un total de 40 combinaciones de iniciadores fueron utilizados para la selección de los marcadores AFLP candidatos bajo el protocolo “IRDye Fluorescent AFLP Kit for Large Plant Genome Analysis”, el cual usa dos colorantes fluorescentes (700 y 800 nm). Posteriormente, se analizaron 78 plantas individuales (40 machos y 38 hembras) con las combinaciones seleccionadas: M-AGG+E-ACC, M-AGG+E-AGG y M-CTG+E-AAC. En cuanto al valor C, se comparó el contenido de DNA por célula entre sexos del sotol. Las muestras frescas fueron tomadas de 10 plantas machos y 10 hembras sotol plenamente identificadas como tal de la región de Providencia. Se extrajeron los núcleos y se tiñeron bajo el protocolo del kit Cystain UV precise P-05-5002. Para el estudio de AFLP los resultados mostraron geles con bandas polimórficas entre sexos que se codificaron binariamente y se analizaron estadísticamente a través del coeficiente de correlación para caracteres categóricos, como medida de asociación. Se detectaron asociaciones significativas mediante la prueba de chi cuadrada, estas bandas mostraron estar asociadas positivamente al género masculino de la especie. Para el análisis comparativo del contenido de DNA, no se encontraron diferencias significativas entre los picos de fluorescencia entre sexos. Sin embargo, se encontró una alta variación dentro de sexos que puede ser causado por metilación y/o pigmentos, lo cual requiere validar estas medidas con otro citómetro de flujo."