Desarrollo de una técnica simple para determinar la capacidad de fertilización de espermatozoides de caprinos, basada en la penetración de oocitos de bovinos.

Abstract

"El objetivo del presente estudio fue desarrollar una técnica simple para evaluar la capacidad de fertilización de los espermatozoides de machos cabríos, utilizando oocitos de bovino tratados con NaOH y diferentes técnicas para la capacitación de los espermatozoides. El trabajo se dividió en tres fases. En la fase 1, se evaluaron diferentes concentraciones (0.5, 1.0 y 1.5 N) y tiempos (2.0, 2.15, 2.5 y 3.0 minutos) de exposición a NaOH para eliminar las células de la granulosa de oocitos de bovino. En la fase 2, se evaluaron las siguientes técnicas de capacitación de los espermatozoides: incubación en oviductos de bovinos, en células de la pared interior de oviductos de bovino, en suero sanguíneo de cabra en estro y en heparina. En la fase 3, se evaluó la fertilización in vitro. En la fase 1 se obtuvo el 100 por ciento de denudación (eliminación de las células de la granulosa y eliminación parcial de la zona pelúcida) de oocitos de bovinos, cuando se utilizó una concentración 1 N de NaOH y un tiempo de exposición de 2.15 minutos. En la fase 2, la capacitación de los espermatozoides incubados en oviductos de bovino, no sobrepasó el 20 por ciento. En este experimento el tiempo de incubación no afectó el porcentaje de células capacitadas (P > 0.05), pero se observó un mayor (x2 = 32.7, 1 gl, P < 0.01) número de células capacitadas con el semen "sin lavar" comparado con el semen "lavado" (sin líquido seminal). No existió interacción entre el estatus del semen y el tiempo de incubación de las células espermáticas. En otro experimento, la capacitación de los espermatozoides incubados con células de la pared interior de oviductos de bovino, alcanzó el 50 por ciento. El estatus del semen no influyó sobre la capacitación de los espermatozoides, pero el tiempo de incubación afectó significativamente (x2 = 4.97, 3 gl, P < 0.05) el número de células espermáticas capacitadas. No existió interacción entre el estatus del semen y el tiempo de incubación. En otro experimento, la proporción de células espermáticas capacitadas con suero sanguíneo de cabra en estro y heparina fueron, 57.5 y 61.0 por ciento cuando se incubaron por 1 hora y, 83.0 y 88.0 por ciento cuando se incubaron por 40 minutos (x2 = 68.9, 1 gl, P < 0.01) respectivamente. El estatus del semen no influyó (P > 0.05) en los resultados encontrados y no existió interacción entre los tratamientos y estatus del semen en la capacitación de espermatozoides de caprinos. En la fase 3 del estudio se llevó a cabo la fertilización in vitro, utilizando una incubadora para huevos de ave. Se obtuvo un 66.6 por ciento (10/15) de penetración de los oocitos tratados con NaOH y expuestos a espermatozoides capacitados con heparina. En el 33.4 por ciento restante de los oocitos no se logró observar cabezas descondensadas de espermatozoides, pero se observó gran cantidad de espermatozoides en la periferia de los oocitos."