Micropropagación, valoración hormonal y código de barras de la vida en epithelantha micromeris y Obregonia dengrii para su conservación

Abstract

"En el presente estudio se persiguen los siguientes objetivos i) Evaluar la efectividad de tratamientos hormonales en la micropropagación de brotes de vitroplantas de Epithelantha micromeris y Obregonia denegrii. ii) Determinar la concentración hormonal endógena en vitroplantas de E. micromeris y O. denegrii por espectrofotometría y cromatografía líquida (LC). iii) Describir el código de barras de la vida de E. micromeris y O. denegrii en base a las secuencias de dos genes (matK y rbcL). La micropropagación de ambas especies se realizó a partir de brotes de vitroplantas de un cm de altura de aspecto uniforme. Los explantes se colocaron en medio MS, adicionado con reguladores de crecimiento vegetal (RCV) en cuatro tratamientos diferentes (T1= Sin reguladores, T2= Kinetina 1 mg L-1, T3= Kinetina 1 mg L-1 + AIA 1 mg L-1, T4= Kinetina 1 mg L-1 + AIA 0.5 mg L-1 + AG 1 mg L-1, T5 = Kinetina 1 mg L- 1 + AIA 1 mg L-1 + AG 1 mg L-1). Se utilizó un diseño completamente al azar con seis repeticiones, cada repetición formada de cuatro plantas. Los brotes se mantuvieron en condiciones controladas con fotoperiodo de 16 hrs luz y temperatura de 26 °C. A los 30, 60 y 90 días se evaluó la altura, el diámetro, el peso fresco y el peso seco de las vitroplantas. Se determinó la concentración endógena de los RCV empleando; reactivo de Salkowsky, para auxinas y cromatografía líquida (CL) para determinar giberelinas. Para la obtención de código de barras de la vida se secuenciaron los genes matK y rbcL y posteriormente fueron comparados con la base de datos de NCBI (National Center for Biotechnology Information). De acuerdo a los resultados obtenidos, los tratamientos T1, T2 y T3 producen vitroplantas de buena calidad en cuanto a diámetro, altura y peso, pero el T3 promueve además la formación de brotes en E. micromeris, por lo que podemos considerarlo como el mejor tratamiento. En O. denegrii los tratamientos no produjeron efectos significativos. En cuanto a la determinación de RCV se encontraron concentraciones de auxinas que van desde 0.12 a 0.28 ppm en E. micromeris, con tendencia descendente con respecto al tiempo de tratamiento. El T3 generó la mayor concentración (0.28 ppm) de AIA a los 30 días. Mientras que las concentraciones de ácido giberélico presentaron un comportamiento ascendente con respecto al tiempo de tratamiento de 0.2 a 4.5 ppm. En O. denegrii se encontraron concentraciones de AIA de 0.13 a 0.17 ppm. El testigo, T1 presentó la mayor concentración con 0.17 y 0.15 ppm a los 30 y 60 días, seguido del T3 y el T5, con 0.15 y 0.14 respectivamente a los 30 días. Con respecto al código de barras de la vida, las especies con mayor similitud a E. micromeris de acuerdo a las secuencias matK es E. micromeris, mientras que para rbcL la especie es Maihuenia poeppigi. Para O. denegrii la especie con mayor similitud de acuerdo a matK es Lophophora williamsii, mientras que por rbcL es Weingartia kargliana. La falta de precisión en la obtención del código de barras de la vida, se debió a que no existe información del gen rbcL, en la base de datos para E. micromeris, ni de rbcL y matK para O. denegrii, no obstante a lo anterior se logró obtener sus árboles filogenéticos, los cuales complementaron los análisis de identidad y facilitaron la ubicación de las secuencias problema dentro de un grupo de especímenes emparentados genéticamente."