Estudio de las variantes genéticas de diaphorina citri, vector de candidatus liberibacter spp. en cítricos.
Tesis de maestría
Versión publicada
Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro
Saltillo, Coahuila, México
"El presente trabajo se basó en técnicas moleculares para la detección de Candidatus Liberibacter de las especies americana y asiática, se utilizó la técnica PCR punto final y se aplicó a muestras vegetales y de insectos usando los iniciadores BK-DY2F (5´-
CGCGTATGCAATACGAGCGGCA-3´) Y BK-DY2R (3´-
GCCTCGCGACTTCGCAACCCAT-5´) para la especie asiática y BK-DY1F (5´-
AGTCGAGCGAGTACGCAAGTACT-3´) y BK-DY1R (3´-
CAACTTAATGATGGCAAATATAG-5´) para la especie americana. No se detectó presencia de Huanglongbing en ninguno de los casos, se concluyó que esto pudo deberse a que no se eligieron plantas con sintomatología aparente. Se sugiere el uso de PCR Tiempo Real o PCR anidada y se propuso que los muestreos sean basados en plantas con sintomatología aparente.
La técnica que se usó para la identificación de haplotipos del Psílido Asiático de los Cítricos (PAC) fue PCR punto final. La amplificación del ADN se realizó con los iniciadores
específicos DCITRI COI-L y DCITRI COI-R, el producto de la reacción PCR fue secuenciado en el Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica A. C. (IPICYT), obteniendo 22 secuencias finales que se analizaron con los programas Oligo analizer y Clustal Omega. Las secuencias obtenidas se compararon con las que se encuentran reportadas en el GenBank y se determinó que existe una línea matriz que corresponde al haplotipo Dcit-1 con número de identificación FJ190306, sin embargo, también existen algunos individuos con diferencias en dos nucleótidos y que corresponden a los sitios de muestreo donde no hay estudios previos. Se identificaron dos nuevos posibles haplotipos a los que se les denominó DcitACC-1 y DcitACC-2. La distribución de las nuevas variantes corresponde a estados que no se han estudiado anteriormente, el haplotipo Dcit-1 ya se ha reportado en Nuevo León (Fuentes et al., 2018). Las nuevas posibles variantes pueden estar relacionadas con las condiciones climáticas a las que habita el PAC. Se sugirió realizar muestreos más amplios en zonas donde el PAC no haya sido estudiado, esto con la finalidad de describir todas las variantes distribuidas en el país."
Estudiantes
Investigadores