Extracción y purificación de DNA en hojas de maíz sin el uso de nitrógeno liquido

Abstract

"El presente trabajo de investigación se realizó en el Rancho el Retiro el cual se encuentra ubicado en San Pedro de la Colonias Coahuila, propiedad de la Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro Unidad Laguna. Se evaluaron genotipos del CENTRO INTERNACIONAL DE MEJORAMIENTO DE MAIZ Y TRIGO (CIMMYT), se seleccionó la línea 3 para el estudio, dos surcos por línea de 10 m de largo. Se colectaron 25 hojas de las plantas de la línea 3 y se llevaron al laboratorio para su análisis. Las hojas de las plantas se secaron y molieron. Para la extracción del DNA se llevó a cabo un diseño completamente al azar con cuatro tratamientos (T1-T4) y un control comercial (Plant DNAzol®). Se realizaron 25 repeticiones y la lectura por triplicado para las determinaciones de concentración y pureza. Se realizó un análisis de varianza y prueba de medias de Tukey (P <0.05) entre tratamientos. Los resultados de análisis de varianza mostraron diferencia altamente significativa (P<0.001) entre tratamiento y efecto del equipo de cuantificación. El rendimiento de extracción del DNA (ng de DNA mg de tejido de planta-1), fueron de 587 y 369 con los tratamientos T4 y T1 respectivamente, sin embargo, la pureza oscilo entre 1.0-2.8, para el primero y 1.0-1.4 para el segundo. La cantidad y la calidad del producto de extracción son relevantes y a considerar, así como la validación del método de extracción y la calibración del equipo de medición, mediante estándares certificados o internos de calidad comprobada"