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dc.contributor.advisorLanderos Flores, Jerónimo
dc.contributor.authorCerna Chávez, Ernesto
dc.contributor.otherGuerrero Rodríguez, Eugenio
dc.contributor.otherFlores Olivas, Alberto
dc.date.accessioned2021-08-31T15:16:31Z
dc.date.available2021-08-31T15:16:31Z
dc.date.issued2006-10-01
dc.identifier.urihttp://repositorio.uaaan.mx:8080/xmlui/handle/123456789/47467
dc.descriptionEn la evaluación a la respuesta de la línea de laboratorio de Tetranychus urticae a los diferentes acaricidas, la perdida de la resistencia fue claramente observable a través del tiempo. Presentando los valores mas altos de susceptibilidad para el producto abamectina (0.02 ppm). Para las líneas de campo de hembras adultas de T. urticae expuestas a diferentes acaricidas, estas mostraron mayor nivel de susceptibilidad de acuerdo al grupo toxicológico según su CL50 en el siguiente orden: para la línea de campo con manejo de acaricidas, Lactonas Macrocíclicas (1.9 ppm), Organo-Estanosos (508 ppm), Clorados (883 ppm), Piretroides (904 ppm) y Fosforados (1083 ppm). Mientras que, para la línea de campo sin manejo fueron, Lactonas Macrocíclicas (1.03 ppm), Piretroides (1943 ppm), Clorados (1995 ppm), Fosforados (2720 ppm) y Organo-Estanosos (4107 ppm)es_MX
dc.description.abstract"El presente trabajo de investigación se realizó en la Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro en Saltillo, Coahuila, México. En los laboratorios del departamento Parasitología agrícola, durante el periodo de Agosto del año 2003 a Diciembre del año 2005. Teniendo como objetivo determinar a través de varios métodos de diagnostico la susceptibilidad y los mecanismos bioquímicos de resistencia; así como la variación intraespecífica de Tetranychus urticae, proveniente de campos de fresas del bajío mexicano. Se colectaron ácaros de dos manchas en campos productores de fresa del estado de Guanajuato, México. El material colectado se trasladó al laboratorio de acarología de la universidad, para determinar el nivel de susceptibilidad, los mecanismos enzimáticos de resistencia presentes y la variación intraespecífica. Utilizando una línea susceptible de T. urticae como referencia (Narro susceptible, L-Ns). El primer método utilizado para determinar la susceptibilidad y los mecanismos presentes fueron los Bioensayos, por medio de la técnica de inmersión en hoja, evaluando las poblaciones de T urticae contra los acaricidas abamectina, bifentrina, dicofol, óxido de fenbutatin y naled. Así como la mezcla de estos con los sinergistas butóxido de piperonilo (BP), SSS-tributilfosforotritioato (DEF) y el dietil maleato (DEM). El segundo método utilizado fue a base de una serie de pruebas bioquímicas (ensayos en microplacas), Los métodos en microplacas se tuvieron que adaptar a partir de los métodos ya descritos para mosquitos (Brogdon et al., 1983, 1984, 1988, 1990 y 1997), para poder determinar los niveles de a-esterasas, p-esterasas, oxidasas, glutation s-transferasas, acetilcolinesterasa y acetilcolinesterasa insensible en T. urticae. Por ultimo, para determinar el grado de variabilidad intraespecífica de T urticae en relación a la resistencia a plaguicidas, se utilizó la metodología para PCR-RAPD's descrita por Williams et al. (1990), utilizando el kit B de Biomol y el oligonucleotido (5'-GTGCTCGGCG-3') reportado por Udalov et al. (2005) para discriminar entre líneas susceptibles y resistentes de T urticae. Los resultados de los bioensayos muestran una proporción de resistencia entre la línea de campo y la susceptible, con valores de 57.4, 8.0, 11.2, 11.3 y 9.0 veces para los productos abamectina, bifentrina, dicofol, óxido de fenbutatin y naled respectivamente. La mezcla del sinergista butóxido de piperonilo (BP) más los acaricidas abamectina, bifentrina, dicofol, óxido de fenbutatin y naled incrementan su toxicidad en 7.86, 3.69, 10.78, 2.45 y 4.79 veces respectivamente. Para el sinergista SSS-tributilfosforotritioato (DEF) el incremento fue 2.15, 6.65, 5.54, 1.73 y 2.65 veces; y para el dietil maleato (DEM) fue 3.17, 2.44, 3.90, 1.95 y 6.34 veces para los mismos acaricidas. Los valores más altos de sinergismo se obtuvieron con el butóxido de piperonilo, lo cual indica que la mayor causa de resistencia fisiológica para la línea de campo de T urticae es por enzimas oxidasas. De este modo, los resultados obtenidos al utilizar las pruebas en microplacas encontramos que, para las enzimas a y p-esterasas un 40 por ciento de las muestras superaron el umbral de resistencia. Para las glutation s-transferasas y oxidasas un 17 y 77 por ciento respectivamente. Por último para las enzimas acetilcolinesterasa y acetilcolinesterasa insensible fue de un 10 y un 6 por ciento de las muestras que superaron el umbral. Al realizar una comparación entre la cantidad de enzima presente en base a la cantidad promedio de absorbancia encontramos que el principal factor de resistencia para la línea de campo son las enzimas oxidasas (2.0251), seguida por las a y p-esterasas (1.1784 y 1.3801 respectivamente). En relación a la variabilidad intraespecífica de T. urticae, podemos mencionar que los oligonucleótidos del kit B, no presentaron amplificaciones. Por tal motivo, se corrió la prueba con un oligonucleotido reportado por Udalov et al., 2005. Donde, tres de las 14 líneas utilizadas amplificaron (Líneas 3, 6 y 9), de las cuales dos líneas fueron colectadas en el cultivo de fresa y la otra de maíz, de los estados de Michoacán y Guanajuato. Por lo que podemos mencionar que la línea de campo de Tetranychus urticae colectada en el cultivo de la fresa del estado de Guanajuato, muestra resistencia en la que intervienen principalmente las enzimas oxidasas"es_MX
dc.formatPDFes_MX
dc.languageEspañoles_MX
dc.publisherUniversidad Autónoma Agraria Antonio Narroes_MX
dc.rightsAcceso Abiertoes_MX
dc.rights.uriCC BY-NC-ND - Atribución-NoComercial-SinDerivadases_MX
dc.subjectCIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍAes_MX
dc.subject.otherArañitaes_MX
dc.subject.otherManchases_MX
dc.subject.otherFresaes_MX
dc.titleMecanismos bioquímicos de resistencia y variación intraespecifica de (tetranychus urticae koch) en zonas productoras de fresa del bajío mexicanoes_MX
dc.typeTesis de doctoradoes_MX
dc.description.abstractEn"This research work was carried out at "Universidad Autonoma Agraria Antonio Narro" in Saltillo, State of Coahuila, Mexico, in the Agricultural Parasitology Department, from August 2003 to December 2005. The purpose of this work was to determine by means of several diagnosis methods, the susceptibility and the biochemical resistance mechanisms; as well as the intraspecific variability of Tetranychus urticae, obtained from strawberry fields of "El Bajio" region, Mexico. Two-spotted spider mites were collected from strawberry fields in Guanajuato , Mexico. This material was transferred to the acarology university laboratory, where several trials were run in order to determine the susceptibility level, the presence of resistance enzymatic mechanisms, and the intraspecific variability using a susceptible line of T urticae as benchmark (Narro susceptible, L-Ns). Leaf immersion bioassays were the first test methods used to determine susceptibility and the presence of enzymatic mechanisms. T. urticae populations were studied using the following acaricides: abamectine, biphentrine, dicophol, phenbutatin oxide and naled; as well as a blend of these compounds with the synergistic compounds piperonyle butoxide (BP, SSS-tri-butyl phosphorous tri-thioate (DEF) and malate diethyl (DEM). A second test method consisted in biochemical tests (microplate essays), adapted from the mosquitoes methods previously described by Brogdon et al. ( 1983, 1984, 1988, 1990 and 1997), to be able to determine the levels of a-esterases, (3-esterases, oxidases, glutation s-transferases, acetylcholinesterase and insensible acetylcholinesterase in T urticae. Lastly, in order to determine the degree of intraspecific variability of T urticae regarding pesticides resistance, the PCR-RAPD's technique described by Williams et al. (1990) was used; using kit B of Biomol and the oligonucleotide (5'-GTGCTCGGCG-3') reported by Udalov (2004) to discriminate between susceptible and resistant lines of T. urticae. The bioassays showed that the proportion of resistance between the field line and the 'susceptible line resulted in values of: 57.4, 8.0, 11.2, 11.3 and 9.0 times for abamectine, biphentrine, dicophol, phenbutatin oxide and naled, respectively. On the other hand, the synergistic blend of piperonile butoxide (BP) plus abamectine, biphentrine, dicophol, phenbutatin oxide and naled, increased their toxicity by: 7.86, 3.69, 10.78, 2.45 and 4.79 times respectively. In the case of SSS-tributyl-phosphorus tri-thioato synergistic compound (DEF), the increase was: 2.15, 6.65, 5.54, 1.73 and 2.65 times; while for malate diethyl (DEM) the results were: 3.17, 2.44, 3.90, 1.95 and 6.34 times for the same acaricides. Thereby, the highest levels of synergism were obtained with piperonile butoxide, indicating that the greatest source of physiological resistance for the field line of T urticae comes from oxidases. The results obtained from the microplate essays revealed that in the case of a and f3-esterases, 40 percent of the samples exceeded the resistance threshold; whereas for glutation s-transferases and oxidases the values were 17 and 77 percent respectively. Finally, in the case of acetylcholinesterase and insensible acetylcholinesterase, 10 and 6 percent of the samples exceeded the threshold. When carrying out a comparison between the amount of enzymes present, according to the average absorbance, we found that the main resistance factor for the field line carne from oxidases (2.0251), followed by a y 0-esterases (1.1784 and 1.3801 respectively). With regards to the intraspecific variability of T urticae; B kit oligonucleotides did not result in any amplification. Therefore, we ran another test using the oligonucleotide reported by Udalov, 2004. This test resulted in three amplifications out of the 14 lines (Lines 3, 6 and 9). Two of these three lines were collected from strawberry and corn crops respectively, in the states of Michoacan and Guanajuato, Mexico.. We can thereby conclude that Tetranychus urticae fíeld line, collected from the strawberry field in Guanajuato, showed positive results with the different methods used in resistance detection. With regards to the enzymatic mechanisms, oxidases represented the main resistance factor"es_MX
dc.type.versionVersión publicadaes_MX
dc.audienceEstudianteses_MX
dc.audienceInvestigadores
dc.publisher.placeSaltillo, Coahuila, Méxicoes_MX


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